關于玉米原生質體的提取

      一、酶解液的組成：
      1 纖維素酶0.7% 果膠酶0.5% 山梨醇14% 氯化鈣5mmol•L-1, pH5.8

      二、漂洗液的組成：
      山梨醇14%，硝酸鉀 1mmol•L-1, 磷酸二氫鉀0.2 mmol•L-1, 氯化鈣0.5 mmol•L-1,
硫酸銅0.01 µmol•L-1

      三、材料預處理：
      取黃化葉片，去中脈后放入25％的蔗糖溶液中處理15～20min，使其發(fā)生質壁分離，然后用于酶解

      四、進行兩次酶解
      在第二次酶解結束后，將葉片取出放于漂洗液中漂洗抖動使原生質體釋放出來，然后將漂洗液在 1500 rpm離心 5 min，沉淀即為原生質體，實驗證明在離心力為2500rpm,時間5min時，原生質體得到率最高。