粗脂肪酶活力的測定方法的研究

脂肪酶又稱甘油酯水解酶, 它能催化甘油三酯水解生成甘油二酯或甘油一酯或甘油和脂肪酸。粗脂肪酶由于保存不當或放置時間較長, 常常會使活力下降, 因此, 使用時必須對粗脂肪酶活力進行測定。檢測脂肪酶活力的方法有很多種, 所使用的底物也很多, 各有優(yōu)缺點。目前為止, 還沒有一種統(tǒng)一的檢測手段, 各生產(chǎn)廠家和科研部門通常根據(jù)自己的實驗條件來制定各自的檢測方法。反映脂肪分解程度的指標有酸價、碘價、皂化價、過氧化值等。本實驗用酸價作指標, 用95%乙醇作終止劑, 通過酸價的測定反映脂肪酶分解脂肪的程度, 從而求得酶活力。旨在探討一種新的快速的測定粗脂肪酶活力的一種方法。

1　材料與方法

1.1　實驗材料

1.1.1　食用色拉油: 市售

1.1.2　生物試劑

粗脂肪酶，標準脂肪酶；

1.1.3　化學試劑

酚酞指示劑95%乙醇溶液0105 mol/LNaOH溶液

1.1.4　主要儀器設備

電熱恒溫水浴鍋　微量滴定管　電子天平 SZF-06A粗脂肪測定儀  纖維測定儀

1.2　方　　法

1.2.1　粗酶液的制備

用電子天平分別稱取粗脂肪酶0.010 g、0.020 g 和0.030 g, 用蒸餾水溶解并定容至100 mL, 配成濃度分別為0.01%、0.02% 和0.03%的粗酶液。

1.2.2　實驗設計

本實驗以10 mL色拉油為底物,以酶用量、水解溫度、反應時間為因素,通過酸價的測定選定其水解的最佳條件。正交實驗設計見表1和表2。